小麦种子纯度是衡量种子质量的核心指标之一，直接影响作物产量、抗逆性和商品价值。传统的形态学鉴定方法受环境因素和人为判断影响较大，检测周期长且准确性有限。随着分子生物学技术的发展，电泳鉴定凭借其高灵敏度、快速性和可重复性，成为现代种子纯度检测的主流方法。该技术通过分析种子的蛋白质或DNA分子标记差异，能够精准识别品种特异性，有效区分混杂的异源种子，为种子质量控制、品种权保护和农业生产安全提供了科学依据。
电泳鉴定主要针对小麦种子中的以下生物分子进行检测：
1. 醇溶蛋白（Gliadins）：利用酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳（A-PAGE）分析醇溶蛋白条带图谱，不同品种具有独特的谱带特征。
2. 谷蛋白（Glutenins）：通过SDS-PAGE分离高分子量谷蛋白亚基（HMW-GS），鉴定品种的遗传差异性。
3. DNA分子标记：采用SSR（简单序列重复）或SNP（单核苷酸多态性）标记，通过电泳检测扩增产物片段长度多态性。
4. 同工酶分析：如过氧化物酶、酯酶等同工酶的活性差异，辅助品种鉴别。
目前主流的电泳检测方法包括：
1. SDS-PAGE（十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳）
通过变性剂分离种子蛋白亚基，适用于高分子量谷蛋白的分离，分辨率可达1kDa，可检测品种间细微差异。
2. A-PAGE（酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳）
在酸性缓冲体系下分离醇溶蛋白，具有操作简便、成本低的特点，广泛用于品种初筛和快速鉴定。
3. 毛细管电泳（CE）
采用自动化设备实现高通量检测，分析时间缩短至15-30分钟，适用于大规模种子质检。
4. 聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳
通过梯度凝胶提高分离效率，特别适用于复杂蛋白混合物的精细分型。
国内外相关标准体系为电泳鉴定提供技术规范：
1. 中国国家标准
• GB/T 3543.5-1995《农作物种子检验规程 真实性和品种纯度鉴定》
• NY/T 1433-2007《小麦品种纯度检测 聚丙烯酰胺凝胶电泳法》
2. 国际标准
• ISTA 国际种子检验规程第8章（品种纯度分子检测）
• UPOV（国际植物新品种保护联盟）电泳图谱判定指南
3. 关键质量控制指标
• 凝胶浓度：通常采用10%-15%分离胶
• 电泳条件：电压200-300V，时间40-90分钟（视凝胶厚度而定）
• 检测灵敏度：应能区分≥5%的异源种子混杂
• 重复性要求：同一样本三次检测结果一致性≥95%
与传统方法相比，电泳鉴定将检测周期从数周缩短至24小时内，准确性提升至99%以上。新型荧光标记技术与图像分析系统的结合，实现了检测结果数字化和智能化判读。未来，随着微流控芯片电泳和质谱联用技术的发展，检测通量和特异性将进一步提升，为种业高质量发展提供更强技术支撑。
